Comparison of two obturation techniques on adhesion and proliferation of human periodontal ligament fibroblasts / Comparación de la adhesión y proliferación de fibroblastos periodontales humanos en dos técnicas de obturación endodóntica

The present study aimed to compare the adhesion and proliferation of human periodontal ligament fibroblasts (hPDL) in transverse sections of the teeth sealed with two different obturation techniques, BioRoot RCS/hydraulic obturation (HO) and AH-Plus/continuous-wave condensation (CWC). The techniques were tested using an in vitro model to simulate the interaction between periodontal tissues and the materials. The root canals were instrumented and sterilized. A total of 15 samples were obturated with BioRoot RCS/HO and 15 samples with AH-Plus/CWC. Then, roots were sectioned to obtain obturated teeth slices, and hPDL cells were seeded onto the root slices. The results were obtained at intervals of 4 and 24h for cell adhesion; and at 3,7,14, and 21 days for cell proliferation. Empty cell culture plates were use as controls. The cell adhesion was increased at 4 and 24h for both groups, with an increased response observed in the BioRoot RCS/HO group (p<0.05). The difference in cell proliferation was also found between experimental groups. After 14 days of culture, BioRoot RCS/HO group showed an increase response than control and AH-Plus/CWC groups (p<0.05), and after 21 days both groups behaved better than control group, with an increased response observed in the BioRoot RCS/HO group. This study demonstrated that both root canal sealers allow the attach and growth of periodontal ligament fibroblasts, with an increased biological response in the BioRoot RCS/HO group.

El presente estudio se enfocó en comparar la adhesión y proliferación de fibroblastos de ligamento periodontal humano (hPDL) en secciones transversales de raíces previamente obturadas con dos técnicas de obturación diferentes: obturación hidráulica empleando cono único de gutapercha y BioRoot RCS como sellador (HO), y obturación de condensación de onda continua y AH-Plus como sellador (CWC). Los selladores se usaron en un modelo in vitro que simula la interacción entre los tejidos periodontales y los materiales de obturación. Los conductos radiculares fueron instrumentados, esterilizados y obturados. La muestra se compuso de un total de 15 raíces con la técnica BioRoot RCS/HO y 15 raíces con la técnica AH-Plus/CWC. Las células de hPDL fueron sembradas en condiciones estándar de cultivo sobre las raíces seccionadas. Los resultados fueron obtenidos a intervalos de 4 y 24h para adhesión celular, y a los 3,5,7,14 y 21 días de cultivo para proliferación celular. La adhesión celular a las 4 y 24 horas mostró ser diferente para ambas técnicas en comparación con el grupo control, siendo más importante en el grupo BioRoot RCS/HO. La diferencia en la proliferación entre grupos se observó a los 14 días de cultivo, únicamente para el grupo BioRoot RCS/HO; Sin embargo para el día 21 ambas técnicas mostraron mayor proliferación celular que el grupo control, con mejor respuesta para el grupo BioRoot RCS/HO. Este estudio ha demostrado que ambos selladores de conductos permiten la adhesión y crecimiento de fibroblastos de ligamento periodontal, siendo el grupo BioRoot RCS/HO el que mostró mayor biocompatibilidad.

The effect of hyaluronic acid on the periodontium in spontaneous periodontitis in rats / El efecto del ácido hialurónico sobre el periodonto en periodontitis espontánea en ratas

SUMMARY: The aim of the article was to study changes in periodontal tissues in rats with spontaneous periodontitis (SP) and to evaluate the effect of hyaluronic acid (HA) on the state of the periodontium. Wistar rats with signs of SP were divided into 6 groups: 1) intact group; 2) intact animals with HA "HD-1,0 MDa"; 3) SP group; 4) SP with HA "S-2,4 MDa"; 5) SP with HA "ST-2,4 MDa"; 6) SP with HA "HD-1,0 MDa". The study of the periodontium rats with SP noted the main structural changes (collagen reduction, resorption of alveolar bone, dilatation and stasis of the vessels of the periodontium, gingival papilla and tooth pulp), which were assessed as moderate. Morphological evidence of inflammation was infiltration of neutrophils into the connective tissue of the gums, without the formation of abscesses. Local administration of HA did not cause additional structural damage in periodontal tissues of rats with SP, but also did not affect changes in the microvascular system of periodontium and tooth pulp, periodontal ligaments, only a tendency to inhibit alveolar bone resorption in rats was noted. One can consider the tendency to improve the condition of periodontal tissues in the group of rats injected with high molecular HA and HA with mannitol (2.4 MDa).

RESUMEN: El objetivo del artículo fue estudiar los cambios en los tejidos periodontales en ratas con periodontitis espontánea (PE) y evaluar el efecto del ácido hialurónico (HA) sobre el estado del periodonto. Las ratas Wistar con signos de PE se dividieron en 6 grupos: 1) grupo intacto; 2) animales intactos con HA "HD-1,0 MDa"; 3) grupo PE; 4) PE con HA "S-2,4 MDa"; 5) PE con HA "ST-2,4 MDa"; 6) PE con HA "HD-1,0 MDa". En las ratas con PS se observaron los principales cambios estructurales (reducción de colágeno, reabsorción del hueso alveolar, dilatación y estasis de los vasos del periodonto, papila gingival y pulpa dentaria), que fueron evaluados como moderados. La evidencia morfológica de inflamación fue la infiltración de neutrófilos en el tejido conectivo de las encías, sin la formación de abscesos. La administración local de HA no causó daño estructural adicional en los tejidos periodontales de las ratas con PE, pero tampoco se produjo cambios en el sistema microvascular del periodonto y en la pulpa dental y ligamentos periodontales.Se observó una tendencia a inhibir la resorción del hueso alveolar. Se puede considerar la tendencia a mejorar el estado de los tejidos periodontales en el grupo de ratas inyectadas con HA de alto peso molecular y HA con manitol (2,4 MDa).

Epithelial rests of Malassez in experimental animals at different ages / Restos epiteliales de Malassez en animales experimentales a diferentes edades

ABSTRACT Epithelial rests of Malassez (ERMs) are fragments of Hertwig's sheath in the periodontal ligament. There is extensive knowledge of their role in the etiology ofpathological processes and current evidence links them to maintenance of periodontal homeostasis. The aim of this study was to assess the behavior of ERMs with relation to the changes in periodontal tissues during growth in an experimental model with Wistar rats. Mesiodistal sections were made of the first lower molars from Wistar rats aged 1 month (n=7), 3 months (n=7) and 5 months (n=6). Sections were stained with H&E to evaluate number of ERMs/ mm, size/area of ERMs (μm2), height of periodontal ligament (PL.h) (pm), area of cement in the furcation zone (C.Ar) (μm2) and bone area related to the ERM zone (BAr/TAr)(%). Posthoc Bonferroni and ANOVA were applied for statistical analysis of results. Number of ERMs/mm declined significantly with age (1m: 4.34±1.51, 3m: 1.48±0.89, 5m: 0.27± 0.50, p<0.05), and there was great variability in size. There was significant increase in C.Ar (1m: 3418.96 ± 905.88, 3m: 19365.76 ± 5500.52, 5m: 32182.76 ± 7114.51, p< 0.05) and interradicular (BAr/TAr) (1m: 25.26 ± 2.37, 3m: 44.70 ± 3.95, 5m: 46.81 ± 7.80, p< 0.05: 1 vs 3, 1 vs 5). There was significant decline in PLh at 5 months (1m: 141.42 ± 29.25, 3m: 162.06 ± 28.21, 5m: 124.72 ± 18.67, p< 0.05: 1 vs. 3, 3 vs. 5). The decline in number of ERMs as animal age increases may be related to the significant increase in C.Ar and reduction in PL.h. It remains to ascertain its relationship with the increase observed in BAr/ TAr. Further studies are needed to learn more about the role of ERMs and their relationship with periodontal tissues when confronted with different normal and pathological stimuli.

RESUMEN Los restos epiteliales de Malassez (ERMs) son fragmentos de la vaina de Hertwig, en el ligamento periodontal. Se conoce extensamente su rol en la etiología de procesos patológicos y actualmente las evidencias los vinculan al mantenimiento de la homeostasis periodontal. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el comportamiento de los ERMs en relación a los cambios de los tejidos periodontales durante el crecimiento en un modelo experimental de ratas Wistar. Se obtuvieron cortes mesio-distales del 1er molar inferior de ratas Wistar de 1 mes (n=7), 3 meses (n=7) y 5 meses (n=6) de edad. En cortes coloreados con H&E, se evalúo: N° de ERMs/mm, tamaño/ área de ERMs (μm2), altura del ligamento periodontal (PL.h) (μm), área de cemento en la zona de furcación (C.Ar) (μm2) y área del hueso relacionado con la zona de los ERMs (BAr/TAr) (%). Los resultados se analizaron estadísticamente mediante ANOVA y Bonferroni post-hoc. El N° de ERMs/mm disminuyó significativamente con la edad (1m: 4.34±1.51, 3m: 1.48±0.89, 5m: 0.27± 0.50, p<0.05), observándose una gran variabilidad de tamaño. Se observó un aumento significativo del CAr (1m: 3418.96 ± 905.88, 3m: 19365.76 ± 5500.52, 5m: 32182.76 ± 7114.51, p< 0.05) y del (BAr/TAr). interradicular (1m: 25.26 ± 2.37, 3m: 44.70 ± 3.95, 5m: 46.81 ± 7.80, p< 0.05: 1 vs 3, 1 vs 5). Además, se halló una disminución significativa en PLh a los 5 meses (1m: 141.42 ± 29.25, 3m: 162.06 ± 28.21, 5m: 124.72 ± 18.67, p< 0.05: 1 vs 3, 3 vs 5). La disminución hallada del número de ERMs conforme aumenta la edad del animal podría vincularse con el aumento significativo del C.Ar y la reducción del PL.h. Resta por dilucidar su relación con el aumento de BAr/TAr. observado. Se requieren más estudios para profundizar sobre el rol de los ERMs y su relación con los tejidos periodontales ante distintos estímulos normales y patológicos.

Los restos de Malassez, vida y destino en los tejidos odontogénicos. Una revisión de la literatura / The remains of Malassez life and fate in the odontogenic tissues. A review of the kiterature

Los restos epiteliales de Malassez son células que se encuentran alrededor de las raíces de las piezas dentarias y forman parte de los tejidos del ligamento periodontal, donde se disponen en forma de red. Las funciones que desempeñan no son muy específicas; sin embargo, se demostró su participación en el mantenimiento del espacio del ligamento periodontal, la regeneración del tejido periodontal, la regeneración del cemento, entre otros. Además, tienen capacidad de diferenciarse en otros linajes celulares, lo que demuestra su capacidad como células madres, y el papel más conocido que tienen es su participación y proliferación en la formación de diversas patologías, como quistes y tumores odontogénicos. (AU)

Epithelial rests of Malassez are cells that are arranged in a network located around the roots of the teeth forming part of the periodontal ligament tissues. The functions that these cells perform are not very specific, however, they have shown to participate in the maintenance of the periodontal ligament space, regeneration of periodontal tissue, including cement regeneration among others. In addition, they are able to differentiate into other cell lineages, thereby demonstrating their capacity as stem cells. These cells are best known for their role in the participation and proliferation of the formation of different pathologies, such as cysts and odontogenic tumors. (AU)

Efeito do laser de baixa intensidade na atividade biológica de células-tronco do ligamento periodontal humano cultivadas sobre arcabouços de quitosana / Effect of low-intensity laser on the biological activity of human periodontal ligament stem cells cultured on chitosan scaffolds

O laser de baixa intensidade (LBI) é capaz de estimular a proliferação de diferentes tipos celulares, porém pouco se sabe sobre sua eficácia na proliferação de células cultivadas na superfície dos biomateriais. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do LBI na proliferação e viabilidade de células-tronco do ligamento periodontal humano (PDLSCs) cultivadas em arcabouços de quitosana. A quitosana foi submetida a testes para identificação do teor real de massa e grau de desacetilação. Membranas de quitosana foram preparadas pela técnica de evaporação de solvente e submetidas a caracterização de morfologia e de superfície. PDLSCs previamente isoladas e caracterizadas foram cultivadas sobre quatro superfícies: (P) plástico da placa de cultivo, não irradiado, como controle positivo de crescimento celular; (Q) quitosana, não irradiado; (L1) quitosana, irradiado com dose de 1 J/cm²; e (L4) quitosana, irradiado com 4 J/cm². As irradiações foram realizadas com laser diodo InGaAlP, com comprimento de onda de 660 nm, potência de 30 Mw, diâmetro da ponta de 0.01cm² e modo de ação contínuo, em dose única. Os dados mostraram que a quitosana apresentou um teor real de massa de 88,08% e grau de desacetilação de 91,37±3,77%. A análise das membranas por MEV mostrou superfície uniforme e homogênea, com espessura média de 68,71 µm. A análise por microscopia de força atômica revelou uma rugosidade média de 285 nm. O peso das membranas variou de 0,03 a 0,04 g, indicando a sua uniformidade, e o pH de superfície exibiu média de 6,9±0,25, valor próximo ao pH da saliva. A viabilidade e a proliferação celular foram avaliadas através dos ensaios de Alamar Blue, Live/Dead, Annexin V/PI e Ki67, além da análise do ciclo celular, e a morfologia celular foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). O ensaio do Alamar Blue mostrou diferenças significativas na atividade mitocondrial entre os grupos nos intervalos de 24 h (L1>Q, p= 0,0118) e em 48 h (L1>Q, p= 0,0022; L4>Q, p=0,0002; L4>L1, p= 0,0022). O ensaio Live/Dead mostrou maior densidade de células vivas nos grupos irradiados (L1 e L4) em relação ao grupo sem irradiação (Q), o que foi comprovado pelo ensaio da Annexin V/PI, que mostrou um maior percentual de células viáveis em L4 (89,5%) e L1 (87,0%) em comparação com Q (78,4%) em 72 h. A imunoexpressão da proteína Ki67 foi maior em L4 e L1 e estes dois grupos apresentaram também um maior percentual de células nas fases proliferativas do ciclo celular (S e G2/M). A análise por MEV mostrou no grupo Q células com morfologia mais arredondada e com poucas projeções, além de debris celulares, enquanto nos grupos irradiados as células exibiram um arranjo mais plano, com projeções mais distribuídas e pontos de adesão focal, especialmente em L4. Em conjunto, os resultados do presente trabalho permitem concluir que a laserterapia nos padrões estudados, especialmente na dose de 4 J/cm², influencia positivamente a viabilidade e a proliferação de PDLSCs em membranas de quitosana, permitindo assim que as células superem eventuais efeitos adversos do microambiente do arcabouço (AU).

Low-level laser irradiation (LLLI) is able to stimulate the proliferation of various cell types, but little is known about its effectiveness on the proliferation of cells cultured on biomaterial surfaces. The aim of this study was to evaluate the influence of LLLI on the proliferation and viability of human periodontal ligament stem cells (PDLSCs) cultured on chitosan scaffolds. Chitosan was submitted to tests to identify the real mass content and degree of deacetylation. Chitosan membranes were prepared by solvent evaporation technique and submitted to morphology and surface characterization. PDLSCs previously isolated and characterized were grown on the surfaces of four groups: (P) culture plate plastic, non-irradiated, as a positive control of cell growth; (C) chitosan, non-irradiated; (L1) chitosan irradiated with a dose of 1 J/cm²; and (L4) chitosan, irradiated with 4 J/cm². The irradiations were performed with InGaAlP diode laser with wavelength of 660 nm, power 30 mW, tip diameter of 0.01cm², and continuous action mode in a single dose. Cell viability and proliferation were evaluated by Alamar Blue, Live/Dead, Annexin V/PI and Ki67 assays, as well as cell cycle analysis, whereas cell morphology was evaluated by MEV. The data showed that the chitosan presented a real mass content of 88.08% and degree of deacetylation of 91.37 ± 3.77%. SEM analysis showed membranes with uniform and homogeneous surface, with a mean thickness of 68.71 µm. Analysis by AFM revealed roughness around 285 nm. The weight of the membranes ranged from 0.03 to 0.04 g, indicating their uniformity, and the surface pH exhibited a mean of 6.9 ± 0.25, a value close to the pH of the saliva. The Alamar Blue assay showed significant differences in mitochondrial activity between groups at 24 h (L1> C, p = 0.0118) and at 48 h (L1> C, p = 0.0022; L4> C, p = 0.0002; L4>L1, p = 0.0022). The Live/Dead assay showed higher density of live cells in irradiated groups (L1 and L4) compared to the group without irradiation (C), which was confirmed by assay of Annexin V/PI, which showed a greater percentage of viable cells in L4 (89.5%) and L1 (87.0%) compared to C (78.4%) at 72 h. The Ki67 immunoexpression was higher in L4 and L1 and these two groups also showed a higher percentage of cells in the proliferative phases of the cell cycle (S and G2/M). The SEM analysis showed in group C cells with more rounded morphology and with few projections, as well as cell debris, whereas in the irradiated groups the cells exhibited a more flat arrangement, more distributed projections and focal adhesion points, especially in L4. Taken together, the results of the present study shown that laser therapy in the studied patterns, especially at the dose of 4 J/cm², has a positive effect on viability and proliferation of PDLSCs on chitosan membranes, thereby allowing the cells to overcome any adverse effects of the scaffold microenvironment (AU).

Un modelo didáctico ex vivo para la medición electrónica de la longitud de trabajo en la enseñanza de grado y posgrado / An ex vivo didactic model for electronically determination of the working length in undergraduate and graduate training

El propósito de este artículo es presentar un modelo didáctico ex vivo para la determinación electrónica de la longitud de trabajo, mediante el empleo de elementos con propiedades similares a los tejidos perirradiculares humanos. El modelo es especialmente aplicable a la enseñanza de grado y posgrado y permite observar paso a paso, en el interior del conducto radicular, de qué manera se desarrolla el proceso de medición electrónica (AU)

The purpose of this article is to describe an ex vivo didactic model to determine the working length using elements with properties similar to periradicular human tissues that are available. The model is specifically designed to be used by undergraduate and graduate students and allowed step by step visual observation of the operation of electronic canal length measuring devices (AU)

Influence of testing parameters on the load-bearing capacity of prosthetic materials used for fixed dental prosthesis: A systematic review / Influência de parâmetros de testes na capacidade de suporte de carga de materiais protéticos utilizados para prótese dentária fixa: uma revisão sistemática

Objective: The aim of this study was to systematically review the literature to assess static fracture strength tests applied for fixed dental prostheses (FDPs) and analyze the impact of periodontal ligament (PDL) simulation on the fracture strength. Material and Methods: Original scientific papers published in MEDLINE (PubMed) database between 01/01/1981 and 10/06/2018 were included in this systematic review. The following MeSH terms, search terms, and their combinations were used:"Dentistry", "Fracture Strength", "Fracture Resistance", "Fixed Dental Prosthesis", "Fixed Partial Denture", "Mechanical Loading". Two reviewers performed screening and analyzed the data. Only the in vitro studies that reported on load-bearing capacity of only FDP materials where mean or median values reported in Newnton (N) were included. Results: The selection process resulted in the 57 studies. In total, 36 articles were identified related to allceramics, 10 were fiber reinforced composite resin (FRC), 8 of composite resin (C) and 5 of metalceramic. As for clinical indications, 3 and 4-unit FDPs were more commonly studied (n=32; with PDL=21, without PDL=11), followed by single crowns (n=13; with PDL=3, without PDL=10), and inlay-retained and cantilever FDPs (n=12; with PDL=8, without PDL=4). Conclusion: An inclination for decreased static fracture strength could be observed with the simulation of PDL but due to insufficient data this could not be generalized for all materials used for FDPs (AU)

Objetivo: O objetivo deste estudo foi revisar sistematicamente a literatura para avaliar os testes de força de fratura estática aplicados para próteses dentárias fixas (FDPs) e analisar o impacto da simulação do ligamento periodontal (PDL) na resistência à fratura. Material e Métodos: Artigos científicos originais publicados na base de dados MEDLINE (PubMed) entre 01/01/1981 e 10/06/2018 foram incluídos nesta revisão sistemática. Foram utilizados os seguintes termos MeSH, termos de pesquisa e suas combinações: "Dentistry", "Fracture Strength", "Fracture Resistance", "Fixed Dental Prosthesis", "Fixed Partial Denture", "Mechanical Loading". Dois revisores realizaram a triagem e analisaram os dados. Apenas os estudos in vitro que reportaram a capacidade de suporte de carga de FDP, com os valores das médias ou medianas relatados em Newton (N) foram incluídos. Resultados: O processo de seleção resultou em 57 estudos. No total, 36 artigos foram identificados relacionados à restaurações totalmente cerâmicas, 10 em resina composta reforçada com fibra (FRC), 8 em resina composta (C) e 5 em metalocerâmica. Quanto às indicações clínicas, os PDF de 3 e 4 unidades foram mais comumente estudados (n = 32; com PDL = 21, sem PDL = 11), seguidos de coroas isoladas (n = 13; com PDL = 3, sem PDL = 10) e FDPs retidas por inlays e com cantilever (n = 12; com PDL = 8, sem PDL = 4). Conclusão: Uma inclinação para a diminuição da resistência à fratura estática pôde ser observada com a simulação do PDL, mas devido a dados insuficientes, isso não pôde ser generalizado para todos os materiais utilizados para as FDPs (AU)

Study of epithelial rests of Malassez in an experimenal periodontitis model

The aim of this study was to evaluate the morphological alterations of epithelial cell rests of Malassez (ERMs) and their rela tionship with root resorption, in an experimental periodon titis (EP) model at 4 and 11 days. EP was induced in 14 male Wistar rats by placing a cotton thread ligature around the neck of the first lower right molar, for 4 (n=7) and 11 (n=7) days. The contralateral molar (left) was used as control. Following euthanasia, jaws were extracted and processed histologically to provide mesiodistal sections which were subject to H&E stain and histochemical detection technique with tartrateresistant acid phosphatase (TRAP). The following histomorphometric parameters were evaluated on micrographs: bone area (BAr./TAr)(%), number of ERMs/mm2, number of cells/ ERM, ERMs area (µm2), and percentage of root resorption surfaces (%RR). The results were analyzed statistically by ANOVA and Bonferroni post hoc (p£ 0.05). Significant bone loss was observed in molars with EP compared to their controls. In the EP 4Day group, no change was observed in the parameters with relation to the ERMs; however, in the EP 11Day group, there was significant root resorption (%RR) (C: 3.21±3.07, EP4D: 3.91±3.17, EP11D: 23.67± 11.40; p£ 0,05) and increase in ERMs area (µm2) (C: 455.87±145.42, EP4D: 577.6±156.1, EP11D: 1046.3± 582.9; p£ 0,05). No TRAP+ ERM was found in either group. ERM hypertrophy may be related to ERM partici pation in mechanisms tending to establish periodontal homeostasis inhibiting resorption and contributing to periodon tal regeneration (AU)

El objetivo de este trabajo ha sido evaluar las alteraciones morfológicas de epithelial cell rests of Malassez (ERMs) y su relación con la reabsorción radicular, en un modelo de experimental periodontitis (EP) a 4 y 11 días. La EP fue inducida en 14 ratas Wistar macho mediante la colocación de una ligadura de hilo de algodón alrededor del cuello del primer molar inferior derecho, a 4 (n=7) y 11 (n=7) días. El molar contralateral (izquierdo) fue usado como control. Tras la eutanasia, se extrajeron los maxilares y se procesaron histológicamente para la obtención de cortes en sentido mesiodistal que se colorearon con H&E y técnica histoquímica de detección de tartrateresistant acid phosphatase (TRAP). Se tomaron microfotografías y se evaluaron los siguientes parámetros histomorfométricos: Bone area (BAr./TAr)(%), Nº de ERMs/mm2, Nº de células/ERM, área de ERMs (µm2), y porcentaje de superficies de reabsorción radicular (%RR). Los resultados se analizaron estadísticamente mediante Anova y Bonferroni post hoc (p£ 0.05). En los molares con PE se observó una pérdida ósea significativa en relación a sus controles. En el grupo EP 4 días no se observaron cambios en los parámetros en relación a los ERMs, sin embargo, en el grupo PE de 11 días se registró reabsorción radicular (%RR) significativa (C: 3.21±3.07, EP4D: 3.91±3.17, EP11D: 23.67±11.40; p£ 0,05) junto con un aumento del área de ERMs (µm2) (C: 455.87±145.42, EP4D: 577.6±156.1, EP11D: 1046.3±582.9; p£ 0,05). No se observaron ERMs TRAP + en ninguno de los dos grupos. La hipertrofia de los ERMs, podría estar relacionada a la participación de los mismos en mecanismos tendientes a la homeostasis periodontal, inhibiendo dicha reabsorción y contribuyendo a la regeneración periodontal (AU)

Influência da oclusão traumática no processo de reparo do periodonto em dentes submetidos a luxação extrusiva / Influence of traumatic occlusion on the periodontal repair process in teeth submitted to extrusive luxation

O tratamento luxação extrusiva visa o reparo das estruturas de suporte do periodonto com o dente em posição original, contudo pode ser prejudicado por alguns fatores como a oclusão traumática. Este estudo avaliou a influência da oclusão traumática no processo de reparo dos tecidos de suporte periodontais de dentes que sofreram luxação extrusiva. Sessenta ratos Winstar foram divididos em três grupos: Grupo Controle (n=20), Grupo Luxação Extrusiva (n=20) e Grupo Luxação Extrusiva e Oclusão Traumática (n=20), nos períodos experimentais de 7 e 30 dias. O dente de estudo foi o primeiro molar inferior direito. A luxação extrusiva foi simulada pela indução de forças no sentido axial até o seu deslocamento e reposição do dente por pressão digital. A oclusão traumática foi induzida por restauração de resina composta e fio metálico na superfície oclusal, criando uma plataforma plana.Cortes histológicos longitudinais foram corados com hematoxilina e eosina, Picrosirius red e técnica imunoistoquímica para detecção da TRAcP. Foi avaliada a reabsorção óssea e dentária, área de fibras colágenas, matriz extracelular não fibrilar e vasos sanguíneos, número de perfil nuclear e células TRAcP, organização do ligamento periodontal, extensão e intensidade do processo inflamatório. O teste de Kruskal-Wallis e post hoc de Dunn foram utilizados para a comparação entre os grupos (α=0,05). Dentre as diferenças significativas observou-se: aos 7 dias um aumento de células TRAcP e uma diminuição da área óssea do septo inter-radicular em L e LOT, bem como um aumento da reabsorção óssea marginal no grupo LOT quando comparado ao grupo controle; aos 30 dias, as fibras colágenas tipo I tiveram um aumento no grupo L, bem como, aumento da reabsorção óssea marginal nos grupos experimentais. No modelo experimental estudado, a oclusão traumática gerou prejuízo significativo na recuperação nas estruturas de suporte do dente submetido a luxação extrusiva a curto prazo(AU)

The extrusive luxation treatment aims to repair the structures of the periodontium with the tooth in original position, however it can be impaired by some factors such as traumatic occlusion. This study aims to evaluate the influence of traumatic occlusion on the repairing process of the periodontal tissues of the tooth submitted to extruded luxation. Sixty Winstar rats was divided into three groups: Control group (n=20), Extrusive luxation group (n=20) and Extrusive luxation and Traumatic Occlusion group(=20), in the experimental periods of 7 and 30 days. The experimental tooth was the first lower right molar. The extrusive luxation was simulated by the induction of forces in the axial direction until its displacement and replacement of the tooth by digital pressure. Traumatic occlusion was induced by restoration of composite resin and metallic wire on the occlusal surface, creating a flat platform. Longitudinal histological sections were stained with hematoxylin and eosin, Picrosirius red and immunohistochemical technique for the detection of TRAcP. Bone and dental resorption, area of collagen fibers, extracellular non-fibrillar matrix and blood vessels, number of nuclear profile and TRAcP cells, periodontal ligament organization, extent and intensity of the inflammatory process were evaluated. The Kruskal-Wallis and post hoc Dunn tests were used to compare the groups (α = 0.05). Among the significant differences were observed at 7 days an increase of TRAcP cells and a decrease of the interradicular septum bone area in the L and LTO groups, as well as an increase in the marginal bone resorption in the LTO group when compared to the control group; at 30 days, type I collagen fibers had an increase in the L group, as well as increased marginal bone resorption in the experimental groups. In the experimental model studied, traumatic occlusion generate a significanty impairment in the recovery of the periodontal support structures of the tooth submitted to extrusive luxation in a short period(AU)

Medios de almacenamiento para dientes avulsionados. Una revisión / Media storage for avulsed teeth. A review

Resumen La avulsión dental es el desplazamiento completo del diente de su alvéolo que puede ser causado por un traumatismo, en el que se produce la ruptura de las fibras del ligamento periodontal; además puede estar acompañado de lesiones que comprometan el cemento, el hueso alveolar y los tejidos periodontales. Las células del ligamento periodontal, luego de la avulsión, crecen óptimamente en un pH neutro; los medios de almacenamiento deben tener características ideales para que haya crecimiento celular, como: ser líquidos estériles, poseer componentes que nutran las células del ligamento periodontal, estar disponibles en el lugar del accidente, ser de larga duración y vida útil. El índice de trauma dentoalveolar ha aumentado en nuestro país y la principal causa son los accidentes en motocicleta y deportes. Se pierden muchos dientes avulsionados por desconocimiento de colocar este diente en un medio favorable antes de que sea reimplantado por el odontólogo; existen muchos medios y cada día se experimentan más, pero ¿cuáles de estos son realmente benéficos para mejorar el pronóstico de los dientes avulsionados? El propósito de esta revisión es describir los diferentes medios de almacenamiento para dientes avulsionados investigados hasta la fecha, con el fin de determinar cuál es el medio de elección para la conservación de las células del ligamento periodontal en los dientes que serán reimplantados. Se realizó una revisión de la literatura de estudios publicados en idioma inglés y español en la bibliografía médica, utilizando el buscador Pubmed/Medline, Lilacs, BBO y Scielo. La leche fresca pasteurizada sigue siendo el medio de elección, pero teniendo en cuenta que el tiempo extraoral es importante, si no se tiene la leche, los nuevos medios, como la clara de huevo, propóleo, aloe vera y agua de coco, son una buena alternativa en casos de ser los disponibles en el lugar del accidente. Las cajas de rescate son el medio ideal y deben estar disponibles en todos los países.

Abstract Dental avulsion is the complete displacement of a tooth from its alveolus that may be caused by trauma, producing the rupture of fibers from the periodontal ligament and other lesions involving cement, alveolar bone and periodontal tissues. After the avulsion, cells from the periodontal ligament grow optimally in a neutral pH, therefore the storage media must have ideal characteristics for cellular growth, such as: Sterile liquids, periodontal ligament cell nutrients, availability at the place of the accident and long lasting life. In our country, dento-alveolar trauma index has increased and the main cause are accidents in motorcycles and sports. Many avulsed teeth are lost because of the ignorance of placing the tooth in a favorable storage media before the dentist replaces it. There are many storage media and every day other, more are experimented, so then, which of these are beneficial for the outcome of avulsed teeth? The purpose of this review of literature is to describe the different storage media for avulsed teeth to determine which is the best storage media for the conservation of periodontal ligament cells in teeth that will be re-implanted. A literature review was done of articles published in English and Spanish using Pubmed/ Medline, Lilacs, BBO and Scielo. Conclusion: Fresh pasteurized milk is still the storage media of choice, taking into consideration the importance of extraoral time. Other storage media such as egg yolk, propolis, aloe vera and coconut water should be considered as alternatives in case there's no milk available in the place of the accident. Rescue boxes should be available in every country.

Autotrasplante de un tercer molar inmaduro: reporte de un caso / Autotransplantation of an immature third molar: a case report

El autotrasplante se refiere a la transferencia quirúrgica de un dientede una posición a otra en el mismo individuo dentro de los alveolosde dientes extraídos o sitios preparados quirúrgicamente. El autotrasplante de un diente inmaduro puede ser una opción para reemplazarmolares con caries extensas en pacientes jóvenes como una alternativaal reemplazo de dientes con prótesis fi ja o implanto-soportada. Es unprocedimiento clínico con un índice de éxito de 98 por ciento cuando los dientes son trasplantados traumáticamente y el tiempo extraoral se mantiene al mínimo. El estado de desarrollo del diente determina ampliamente el potencial de reparación pulpar después del autotrasplante. Para obtener una pulpa vital en un diente autotrasplantado el foramen apical no debe medir menos de1 mm de diámetro. El área receptora debe ser 1-2 mm más grande y profunda que las medidas de las raíces donadoras parapreservar las células del ligamento periodontal, un óptimo contacto entreambas estructuras puede mejorar el suministro sanguíneo y los nivelesde nutrición de las células del ligamento periodontal, el cual puedeincrementar el éxito del autotrasplante. En este artículo se presenta un caso exitoso de autotrasplante de tercer molar inmaduro.

Autotransplantation refers to the surgical transfer of a tooth fromone position to another in the same individual onto extracted toothsockets or surgical prepared recipient sites. Autotransplantation of animmature teeth can be an option to replace extensive decayed molarsin young patients as an alternative to immediately replacing teeth withfi xed or implant-supported prosthesis. Autotransplantation is a clinicalprocedure with a success rate of 98% when teeth are transplantedatraumatically and when the extraoral time is keep to a minimum.The developmental stage of the tooth highly determines the potentialof pulpal repair after transplantation. To obtain a vital pulp in anautotransplanted tooth, the apical foramen should not be smaller than1 mm in diameter. The recipient area must be 1-2 mm larger and deeperthan the measurements of the donor roots to preserve the periodontalligament cells, an optimal contact between both structures can improvethe blood supply and the level of nutrition to the periodontal ligamentcells, which can increase the success of autotransplantation. In thispaper, we report one case of successful autotransplantation of animmature third molar.

Aislamiento de células mesenquimales del ligamento periodontal de premolares extraídos. Método simplificado / Isolation of periodontal ligament stem cells from extracted premolars. Simplified method

Resumen: El ligamento periodontal es un tejido conectivo fibroso, de origen ectomesenquimal que contiene una población de células troncales postnatales multipotenciales, con capacidad clonogénica y alto índice de proliferación. Se ha conseguido cultivar células troncales postnatales multipotenciales a través de diferentes métodos de extracción, con algunos problemas técnicos. Por esta razón, se compararon seis diferentes métodos a fin de mejorar el aislamiento de células primarias del ligamento periodontal. Se aislaron células troncales postnatales multipotenciales a partir de 36 premolares sanos, que se cultivaron en medio de Eagle modificado por Dulbecco (BioWest) completo (adicionado con L-glutamina, 10% de suero fetal bovino y 1% de antibiótico) y en condiciones estándares de cultivo. Se realizaron los ensayos para proliferación celular mediante la técnica de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5difeniltetrazolio, migración celular a través de la prueba de lesión del cultivo, y se evaluó su diferenciación osteogénica. Los cultivos realizados por triplicado con cada una de las técnicas publicadas, nos condujo a obtener una población mínima de células que fueron susceptibles a contaminarse. Se realizó con el «método simplificado¼: por digestión enzimática y cultivo de explantos, con las células troncales postnatales multipotenciales obtenidas se observó una proliferación durante 14 días en condiciones estándares de cultivo ascendente, en las pruebas de migración las células troncales postnatales multipotenciales cubrieron totalmente la superficie lesionada a las 72 horas, se observó expresión positiva de CD90 en más del 80% de las células; expresión positiva a CD73 en un 70%, CD105 en un 60% y vimentina en un 90% de la población, así como un marcaje negativo a CD11b y CD45. Se observó una diferenciación osteogénica positiva a los 14 días mediante la expresión positiva a RUNX2 en al menos el 15% de las células y a osteocalcina en un 90%, así como las pruebas positivas a rojo de alizarina. Con los resultados obtenidos, podemos afirmar que el método simplificado permite aislar una población de células mesenquimales, que se pueden obtener a partir de premolares sanos extraídos.

Abstract: Periodontal ligament is a fibrous connective tissue of ectomesenchymal origin which contains a multipotent postnatal stem cells population with clonogenic capacity and high proliferation index. Multipotent postnatal stem cells population culture has been achieved through several extraction methods, nevertheless some technical problems have been encountered. For this reason, in the present study, 6 different methods were compared so as to improve isolation of primary periodontal ligament cells. Multipotent postnatal stem cells population were isolated from 36 healthy premolars, which were then cultured in complete Dulbecco m odified Eagle medium (BioWest) (added with L-glutamine, 10% fetal bovine serum and 1% antibiotic), in standard culture conditions. Assays for cell proliferation were conducted with 3-(4,5 dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyltetrazolium technique as well as cell migration through crop injury test, after which osteogenic differentiation was assessed. Cultures were performed in triplicate with each of the published techniques; thus we were able to obtain a minimum population of cells susceptible to contamination. The «simplifled method¼ was conducted through explant enzymatic digestion and culture: with obtained multipotent postnatal stem cells population, a 14 day proliferation was observed in standard conditions of ascendant culture; in migration tests, multipotent postnatal stem cells population totally covered injured surfaces after 72 hours. CD90 positive expression was observed in over 80% of all cells; CD73 positive expression was found in 70% of cells, CD105 in 60% and vimentin in 90% of the population, as well as negative marking to CD11b and CD45. Positive osteogenic differentiation was observed after 14 days, through positive expression to RUNX2 in at least 15% of cells, and to osteocalcin in 90% as well as positive test to alizarin red. Based on obtained results we were able to affirm that the simplified method allows to isolate a population of mesenchymal cells, which might be obtained from extracted healthy premolars.

Evaluación del efecto del plasma rico en plaquetas en diferentes tiempos y conce ntraciones sobre la viabilidad de fibroblastos de ligamento periodontal y osteoblastos / Evaluation of platelet-rich plasma effect at different times and concentrations on periodontal ligament fibroblast and osteoblast viability

Antecedentes: Los factores de crecimiento utilizados en salud se pueden obtener de una fuente autóloga de primera generación llamada plasma rico en plaquetas (PRP). La diversidad de protocolos para prepararlos genera resultados variables en cuanto al tiempo entre la activación del PRP y sus efectos sobre la proliferación y viabilidad celular. Objetivo: Evaluar proliferación y viabilidad celular de fibroblastos de ligamento periodontal y osteoblastos tratados con PRP en diferentes concentraciones y tiempos de aplicación. Métodos: Se cultivaron líneas celulares de fibroblastos y osteoblastos y se preparó el PRP de sangre venosa de un adulto sano mediante centrifugación, seguido de activación con CaCl2 al 10 %. El efecto sobre la proliferación de las líneas celulares tras la aplicación de PRP y plasma pobre en plaquetas al 1 %, al 3 % y al 5 % se evaluó a las 0, 12, 24, 48 y 72 horas después de su activación mediante MTS. El grupo control consistió en cultivos sin tratamiento. Los datos se analizaron mediante las pruebas de Chi cuadrado, Fischer y McNemar. Resultados: Se observó un aumento de la viabilidad en células tratadas con PRP 24 horas después de su activación en una concentración del 5%. El ensayo de viabilidad celular mostró diferencias estadísticamente significativas entre el grupo experimental y el grupo control (p = 0,05). Conclusión: Los cultivos de fibroblastos y osteoblastos mostraron una tendencia a mayor viabilidad 24 horas después de a la activación con PRP al 5 %.

Background : Growth factors used in health treatments can be obtained from a first-generation source called platelet-rich plasma. The variety of protocols to prepare PRP produces variable results regarding PRP activation time and its effects on cell proliferation and viability. Purpose: To evaluate proliferation and cell viability of periodontal ligament fibroblasts and osteoblasts stimulated with PRP in several concentrations and times after PRP activation. Methods: An in vitro study was carried out using periodontal ligament fibroblast and osteoblast cell cultures. PRP from venous blood of a healthy adult was prepared through centrifugation and activated with 10% CaCl2. The effect on cell proliferation after application of 1%, 3%, and 5% PRP and platelet-poor plasma was evaluated at 0, 12, 24, 48, and 72 hours after activation through MTS. The control group consisted of culture that did not receive any treatment. Data were analyzed using Chi square, Fisher, and McNemar tests. Results: The cell viability assay showed statistically significant differences between the experimental and the control groups. Cell viability increased in cells treated with 5% PRP 24 hours after activation (p = 0.05). Conclusions: Fibroblast and osteoblast cell lines tended to be more viable 24 hours after activation with 5% PRP.

Avaliação da alteração do perfil de colágeno de dentes extraídos de pacientes submetidos a radioterapia de cabeça e pescoço

O comprometimento da saúde dental pela incidência de radiação é tido comoresultado da redução do fluxo salivar bem como de possíveis danos radiogênicosdiretos à estrutura dental. A natureza exata destes últimos ainda está por serelucidada. A partir deste contexto, o presente estudo objetiva analisar apredominância anatômica de colágeno tipo I e colágeno tipo III da dentina e doligamento periodontal assim como a quantidade de colágenos tipos I e III doligamento periodontal de dentes contidos nos campos de radiação extraídos depacientes submetidos a radioterapia (RT) para tratamento de neoplasias malignasde cabeça e pescoço. A amostra foi constituída de 20 dentes, sendo oito dentescariados submetidos à dose total de radiação menor que 60 Gy (grupo experimentalI - GE I), seis dentes cariados submetidos à dose total de radiação igual ou maiorque 60 Gy (grupo experimental II - GE II) e seis dentes hígidos erupcionados nãosubmetidos a radiação (grupo controle - GC). Foi realizado estudo histomorfométricoatravés da técnica de coloração Picrosirius Red com luz polarizada. Análisequalitativa: em relação à dentina, percebeu-se predominância de colágeno tipo IIInas regiões circunjacentes às lesões cariosas no GE I, predominância geral decolágeno tipo III em toda a dentina no GE II e predominância geral de colágeno tipo Ina dentina do GC...

Compromised dental health by incidence of radiation is taken as a result of thereduction in salivary flow as well as possible direct radiogenic damage to toothstructure. The exact nature of the latter remains to be elucidated. The aim of thispaper is to investigate the anatomical predominance of collagen type I and type III inthe dentin and periodontal ligament and the amount of these collagens in theperiodontal ligament of extracted teeth within the radiation fields of patients who haveunderwent radiotherapy (RT) for treatment of malignant head and neck tumors. Thesample consisted of 20 teeth, 8 carious teeth of patients who underwent total dose ofless radiation than 60 Gy (experimental group I - EG I), 6 carious teeth of patientswho underwent total radiation dose equal to or greater than 60 Gy (experimentalgroup II - EG II) and 6 healthy erupted teeth not subjected to radiation (control group- CG). A histomorphometrical study was conducted using the staining techniquePicrosirius Red with polarized light. Qualitative analysis of dentin noticed thepredominance of type III collagen in the surrounding regions to carious lesions in EGI, general predominance of type III collagen throughout the dentin of EG II andgeneral predominance of type I collagen in the dentin of the CG...

Influência da oclusão dentária em ratos submetidos a reimplante imediato: estudo histológico do periodonto e imuno-histoquimíco dos restos epiteliais de malassez e células clásticas / Influence of dental occlusion in the periodontium of the teeth rats submitted to immediately replantation: study of epithelial remains of malassez and clastic cells

Alguns fatores podem interferir no prognóstico do reimplante imediato, como a fase da rizogênese dentária, o período de tempo no meio extra-alveolar, meios de conservação, contaminação, o uso e tipo de contenção dentária e a oclusão traumática. Este estudo visa avaliar a influência da ausência ou excesso de carga oclusal no processo de reparo do periodonto, com ênfase nas características histológicas, e analisar dos restos epiteliais de Malassez e das células clásticas na raiz mesial do primeiro molar superior de ratos submetidos a reimplante imediato. Foram divididos em grupos controle (GC),infra-oclusão (GIO) e oclusão traumática (GOT) e os períodos experimentais avaliados de 3, 5, 7, 14 e 30 dias. Análises qualitativas e quantitativas foram realizadas em cortes histológicos corados pelo método da hematoxilina e eosina (HE); e células clásticas (fosfatase ácida resistente ao tartarato, TRAP) e os restos epiteliais de malassez (citoqueratina) pela técnica de imuno-histoquímica. Os dados foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis e pósteste de Dunn, considerando p< 0,05 como significante. No período de 5 dias, os animais do grupo GIO apresentaram espessura do ligamento periodontal e porcentagem da área de matriz extracelular fibrilar e não fibrilar significativamente menor. No 7º dia, animais do GIO mostraram uma redução significativa da porcentagem da área de matriz extracelular não fibrilar e número de células clástica, sendo o oposto no grupo GOT. Aos 30 dias a porcentagem de matriz extracelular não fibrilar e número de células clástica foram menores, e o número de perfil nuclear foi maior no GIO. A oclusão traumática aumentou significativamente o número de células clásticas, enquanto a ausência de forças oclusais retardou o aparecimento e o número das mesmas. Os restos epiteliais de Malassez foram evidenciados, principalmente presente no período de 3 dias pós-operatório e, raramente visualizados nos demais tempos experimentais. Em conclusão, baseado...

Among the factors that can interfere in the immediate tooth replantation prognosis there are the phase of root formation, the extra-alveolar period, storage media, contamination, use and type of dental splint and traumatic occlusion. This study aims to evaluate the influence of absence or excessive occlusal load on periodontal healing process, with emphasis on homeostatic function of epithelial remains of Malassez and clastic cells, dental root of rat molars submitted of immediate replantation. We used 150 male rats , with 5 weeks of life, divided into Control group ( GC ) infra occlusion ( IOG) and traumatic occlusion ( TOG) and the experimental periods evaluated 3, 5, 7, 14 and 30 days.Qualitative and quantitative analyzes were performed on histological sections stained by hematoxylin and eosin (HE); and clastic cells (TRAP) and epithelial remains of Malassez (PAN Cytokeratin) by immunohistochemistry. The data were submitted to the Kruskal-Wallis test post hoc Dunn, the statistical program Graph Prism 6.0 (α = 5%). The epithelial remains of Malassez were present in the 3-day period and absent in other experimental times, in all the groups. In the 5-day period IOG shows thickness of the periodontal ligament and the percentage of fibrillar and non fibrillar extracellular matrix area significantly lower. On the 7th day IOG showed a significant reduction of the percentage of non fibrillar extracellular matrix area and clastic number of cells, and OTG shows the opposite. At 30 days the percentage of non-fibrillar extracellular matrix and the number of clastic cells was lower, and the number of cell profiles was higher in IOG. The traumatic occlusion significantly increases the number of clastic cells, while the absence of occlusal forces retards the onset and the number of them. Early occlusal load should be avoided in the teeth subjected to immediate replantation

Efeito da antibioticoterapia sistêmica com amoxicilina e tetraciclina no processo de reparo da injúria de luxação extrusiva / Effect of systemic antibiotic therapy with amoxicillin and tetracycline in the healing process of the injury extrusive luxation

A luxação extrusiva é uma injúria do ligamento periodontal caracterizada pelo deslocamento parcial do dente do seu alvéolo sendo que o tratamento preconizado consiste no reposicionamento, contenção e alguns autores recomendam a antibioticoterapia sistêmica (ATS). No entanto, não há nenhuma evidência para a utilização da ATS no reparo tecidual após a injúria de luxação extrusiva. O objetivo da pesquisa foi avaliar o efeito da ATS com Amoxicilina e Tetraciclina no processo de reparo da injúria de luxação extrusiva. Noventa ratos (Rattus norvegicus albinus), adultos, machos tiveram seus incisivos superiores direito luxados, deslocados 3mm no sentido axial e após 5 minutos reposicionados. Os animais foram aleatoriamente divididos em três grupos: Soro, Amoxicilina (25mg/Kg) e Tetraciclina (2,5mg/Kg). A medicação foi administrada de 12/12h por gavagem por um período de 7 dias. Os animais sofreram eutanásia nos períodos de 7, 15 e 30 dias após a luxação. A análise estatística foi realizada por meio dos testes de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn’s de múltipla comparação ao nível de 5%. O tecido conjuntivo subjacente à inserção epitelial apresentou um infiltrado inflamatório agudo que foi de menor intensidade e extensão no grupo Amoxicilina nos três períodos pós-operatório analisados. Em todos os grupos o ligamento periodontal estava organizado e o infiltrado inflamatório agudo só apresentou diferença significante aos 7 e 15 dias com melhor resultado para o grupo Amoxicilina. Com relação ao infiltrado inflamatório crônico, tanto na intensidade quanto na extensão, foi maior no grupo Soro. Ocorreram poucas áreas de reabsorção radicular em todos os grupos sem diferença significante. O tecido pulpar na maioria dos espécimes em todos os grupos apresentou calcificações. Pode-se concluir que a antibioticoterapia sistêmica tem um efeito positivo noprocesso de reparo da luxação extrusiva e que a amoxicilina é uma boa opção.

The extrusive luxation is a periodontal ligament injury characterized by partial dislocation of the tooth its alveolus and that the recommended treatment consists of repositioning, contain and some authors recommend systemic antibiotic therapy (SAT). However, there is no evidence for the use of SAT in tissue repair after injury extrusive luxation. The objective is to evaluate the effect of SAT with Amoxicillin and Tetracycline in the repair process of the injury of extrusive luxation. Ninety rats (Rattus norvegicus albinus), adult male had his dislocated right incisor, moved 3 mm in the axial direction and after 5 minutes repositioned. The animals were randomly divided into three groups: Saline, Amoxycillin (25mg/kg) and Tetracycline (2,5mg/kg). The drug is administered of 12/12h by gavage for a period of 7 days. The animals were euthanized at 7, 15 and 30 days after the dislocation. Statistical analysis was performed using the Kruskal-Wallis test and Dunn’s post-test for multiple comparison to the level of 5%. The underlying connective tissue to the epithelial attachment presented an acute inflammatory infiltrate that was less intensity and extent in the Amoxicillin group in the three postoperative periods analyzed. In all groups the periodontal ligament was organized and acute inflammatory infiltrate showed only significant difference at 7 and 15 days with best result for the amoxicillin group. In relation to the chronic inflammatory infiltrate in both the intensity and the extent was greater in the Saline group. There have been few areas of root resorption in all groups with no significant difference. The pulp tissue in most specimens in all groups had calcifications. It can be concluded that systemic antibiotic therapy has a positive effect on the extrusive luxation repair process and that amoxicillin is an good option.

Influência da oclusão dentária em ratos submetidos a reimplante imediato: estudo histológico do periodonto e imuno-histoquimíco dos restos epiteliais de malassez e células clásticas / Influence of dental occlusion in the periodontium of the teeth rats submitted to immediately replantation: study of epithelial remains of malassez and clastic cells

Alguns fatores podem interferir no prognóstico do reimplante imediato, como a fase da rizogênese dentária, o período de tempo no meio extra-alveolar, meios de conservação, contaminação, o uso e tipo de contenção dentária e a oclusão traumática. Este estudo visa avaliar a influência da ausência ou excesso de carga oclusal no processo de reparo do periodonto, com ênfase nas características histológicas, e analisar dos restos epiteliais de Malassez e das células clásticas na raiz mesial do primeiro molar superior de ratos submetidos a reimplante imediato. Foram divididos em grupos controle (GC),infra-oclusão (GIO) e oclusão traumática (GOT) e os períodos experimentais avaliados de 3, 5, 7, 14 e 30 dias. Análises qualitativas e quantitativas foram realizadas em cortes histológicos corados pelo método da hematoxilina e eosina (HE); e células clásticas (fosfatase ácida resistente ao tartarato, TRAP) e os restos epiteliais de malassez (citoqueratina) pela técnica de imuno-histoquímica. Os dados foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis e pósteste de Dunn, considerando p< 0,05 como significante. No período de 5 dias, os animais do grupo GIO apresentaram espessura do ligamento periodontal e porcentagem da área de matriz extracelular fibrilar e não fibrilar significativamente menor. No 7º dia, animais do GIO mostraram uma redução significativa da porcentagem da área de matriz extracelular não fibrilar e número de células clástica, sendo o oposto no grupo GOT. Aos 30 dias a porcentagem de matriz extracelular não fibrilar e número de células clástica foram menores, e o número de perfil nuclear foi maior no GIO. A oclusão traumática aumentou significativamente o número de células clásticas, enquanto a ausência de forças oclusais retardou o aparecimento e o número das mesmas. Os restos epiteliais de Malassez foram evidenciados, principalmente presente no período de 3 dias pós-operatório e, raramente visualizados nos demais tempos experimentais. Em conclusão, baseado...

Among the factors that can interfere in the immediate tooth replantation prognosis there are the phase of root formation, the extra-alveolar period, storage media, contamination, use and type of dental splint and traumatic occlusion. This study aims to evaluate the influence of absence or excessive occlusal load on periodontal healing process, with emphasis on homeostatic function of epithelial remains of Malassez and clastic cells, dental root of rat molars submitted of immediate replantation. We used 150 male rats , with 5 weeks of life, divided into Control group ( GC ) infra occlusion ( IOG) and traumatic occlusion ( TOG) and the experimental periods evaluated 3, 5, 7, 14 and 30 days.Qualitative and quantitative analyzes were performed on histological sections stained by hematoxylin and eosin (HE); and clastic cells (TRAP) and epithelial remains of Malassez (PAN Cytokeratin) by immunohistochemistry. The data were submitted to the Kruskal-Wallis test post hoc Dunn, the statistical program Graph Prism 6.0 (α = 5%). The epithelial remains of Malassez were present in the 3-day period and absent in other experimental times, in all the groups. In the 5-day period IOG shows thickness of the periodontal ligament and the percentage of fibrillar and non fibrillar extracellular matrix area significantly lower. On the 7th day IOG showed a significant reduction of the percentage of non fibrillar extracellular matrix area and clastic number of cells, and OTG shows the opposite. At 30 days the percentage of non-fibrillar extracellular matrix and the number of clastic cells was lower, and the number of cell profiles was higher in IOG. The traumatic occlusion significantly increases the number of clastic cells, while the absence of occlusal forces retards the onset and the number of them. Early occlusal load should be avoided in the teeth subjected to immediate replantation

Efeito da antibioticoterapia sistêmica com amoxicilina e tetraciclina no processo de reparo da injúria de luxação extrusiva / Effect of systemic antibiotic therapy with amoxicillin and tetracycline in the healing process of the injury extrusive luxation

A luxação extrusiva é uma injúria do ligamento periodontal caracterizada pelo deslocamento parcial do dente do seu alvéolo sendo que o tratamento preconizado consiste no reposicionamento, contenção e alguns autores recomendam a antibioticoterapia sistêmica (ATS). No entanto, não há nenhuma evidência para a utilização da ATS no reparo tecidual após a injúria de luxação extrusiva. O objetivo da pesquisa foi avaliar o efeito da ATS com Amoxicilina e Tetraciclina no processo de reparo da injúria de luxação extrusiva. Noventa ratos (Rattus norvegicus albinus), adultos, machos tiveram seus incisivos superiores direito luxados, deslocados 3mm no sentido axial e após 5 minutos reposicionados. Os animais foram aleatoriamente divididos em três grupos: Soro, Amoxicilina (25mg/Kg) e Tetraciclina (2,5mg/Kg). A medicação foi administrada de 12/12h por gavagem por um período de 7 dias. Os animais sofreram eutanásia nos períodos de 7, 15 e 30 dias após a luxação. A análise estatística foi realizada por meio dos testes de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn’s de múltipla comparação ao nível de 5%. O tecido conjuntivo subjacente à inserção epitelial apresentou um infiltrado inflamatório agudo que foi de menor intensidade e extensão no grupo Amoxicilina nos três períodos pós-operatório analisados. Em todos os grupos o ligamento periodontal estava organizado e o infiltrado inflamatório agudo só apresentou diferença significante aos 7 e 15 dias com melhor resultado para o grupo Amoxicilina. Com relação ao infiltrado inflamatório crônico, tanto na intensidade quanto na extensão, foi maior no grupo Soro. Ocorreram poucas áreas de reabsorção radicular em todos os grupos sem diferença significante. O tecido pulpar na maioria dos espécimes em todos os grupos apresentou calcificações. Pode-se concluir que a antibioticoterapia sistêmica tem um efeito positivo noprocesso de reparo da luxação extrusiva e que a amoxicilina é uma boa opção

The extrusive luxation is a periodontal ligament injury characterized by partial dislocation of the tooth its alveolus and that the recommended treatment consists of repositioning, contain and some authors recommend systemic antibiotic therapy (SAT). However, there is no evidence for the use of SAT in tissue repair after injury extrusive luxation. The objective is to evaluate the effect of SAT with Amoxicillin and Tetracycline in the repair process of the injury of extrusive luxation. Ninety rats (Rattus norvegicus albinus), adult male had his dislocated right incisor, moved 3 mm in the axial direction and after 5 minutes repositioned. The animals were randomly divided into three groups: Saline, Amoxycillin (25mg/kg) and Tetracycline (2,5mg/kg). The drug is administered of 12/12h by gavage for a period of 7 days. The animals were euthanized at 7, 15 and 30 days after the dislocation. Statistical analysis was performed using the Kruskal-Wallis test and Dunn’s post-test for multiple comparison to the level of 5%. The underlying connective tissue to the epithelial attachment presented an acute inflammatory infiltrate that was less intensity and extent in the Amoxicillin group in the three postoperative periods analyzed. In all groups the periodontal ligament was organized and acute inflammatory infiltrate showed only significant difference at 7 and 15 days with best result for the amoxicillin group. In relation to the chronic inflammatory infiltrate in both the intensity and the extent was greater in the Saline group. There have been few areas of root resorption in all groups with no significant difference. The pulp tissue in most specimens in all groups had calcifications. It can be concluded that systemic antibiotic therapy has a positive effect on the extrusive luxation repair process and that amoxicillin is an good option

A influência da criopreservação nas células mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal de humanos análise comparativa in vitro / The influence of cryopreservation of mesenchymal stem cells from human periodontal ligament of comparative analysis in vitro

A criopreservação é um processo em que células ou tecidos biológicos são preservados através do congelamento a temperaturas muito baixas e objetiva cessar reversivelmente, de forma controlada, todas as funções biológicas dos tecidos vivos; ou seja, manter a preservação celular de maneira que esta possa recuperar-se com alto grau de viabilidade e integridade funcional. Este trabalho se propôs avaliar in vitro a influência da criopreservação nas células mesenquimais indiferenciadas procedentes do ligamento periodontal de terceiros molares humanos. Para tanto, foram utilizados 6 dentes sadios os quais tiveram as referidas células removidas e cultivadas em meio de cultura α-MEM contendo antibióticos e suplementado com 15% de FBS, em atmosfera úmida com 5% de CO2 a 37º C. As células isoladas de cada amostra foram divididas em dois grupos: Grupo I cultivo celular imediato (células frescas não criopreservadas) e Grupo II criopreservação celular, durante um período de 30 dias. As análises dos índices de adesão e proliferação celular nos diferentes grupos foram realizadas através das contagens das células aderidas às superfícies dos poços de cultivo celular, nos intervalos de 24, 48 e 72 horas após o início do cultivo. O número de células em cada poço foi obtido pela contagem das células viáveis através do uso do hemocitômetro e o método de exclusão das células coradas pelo azul de trypan.

A diferença entre os grupos para cada um dos tempos foi analisada pelo teste de Wilcoxon. Em relação à evolução temporal para cada um dos grupos, a análise foi feita pelo teste de Friedman para verificar a existência de diferença entre os tempos e, quando ela existiu, foi aplicado o teste de Wilcoxon com penalização. Os resultados demonstraram que não houve diferença estatisticamente significativa entre os dois grupos analisados neste estudo. Portanto, conclui-se que o processo de criopreservação, após um período de 30 dias, não exerceu influência no tipo celular estudado; não havendo, portanto, nenhuma diferença na capacidade de crescimento in vitro entre os grupos. (AU)

Cryopreservation is a process where cells or biological tissues are preserved by freezing at very low temperatures and aims to cease reversibly, in a controlled manner, all the biological functions of living tissues, i.e., maintain cell preservation so that it can recover with high degree of viability and functional integrity. This study aimed to evaluate the influence of cryopreservation on the mesenchymal stem cells originating from the periodontal ligament of human third molars by in vitro experiments. Six healthy teeth were removed and the periodontal cells grown in culture medium containing α-MEM supplemented with antibiotics and 15% FBS in a humidified atmosphere with 5% CO2 at 37° C. Cells isolated from each sample were divided into two groups: Group I - immediate cell culture (not fresh cryopreserved cells) and Group II - cell cryopreservation, during a period of 30 days. Analyses of rates of cell adhesion and proliferation in different groups were performed by counting the cells adhered to the wells, in intervals of 24, 48 and 72 hours after the start of cultivation. The number of cells in each well was obtained by counting viable cells with the use of hemocytometer and the method of exclusion of cells stained by trypan blue. The difference between groups for each of the times was analyzed by Wilcoxon test. Regarding the temporal evolution for each group, analysis was done by Friedman's test to verify the existence of differences between times and, when it existed, the Wilcoxon penalty was applied. The results showed no statistically significant difference between the two groups analyzed in this study. Therefore, we conclude that the cryopreservation process, after a period of 30 days, did not influence the cell type studied, and there was no difference in growth capacity in vitro between the groups. (AU)

Efeito do tratamento com Raloxifeno sobre o processo de reparo de reimplante dentário tardio: estudo histológico em ratas / Effects of raloxifene treatment on wound healing following delayed tooth replantation: histomorphometric analysis in rats

Objetivos: O objetivo do trabalho foi analisar o efeito da ovariectomia e a terapia de reposição hormonal com 17β-estradiol e raloxifeno no processo de reparo do reimplante dentário tardio por meio da análise histomorfométrica em ratas. Materiais e métodos: Quarenta ratas Wistar (Rattus norvegicus, albinus) com ciclos estrais normais foram divididas aleatoriamente em 04 grupos: grupo Sham (grupo controle), grupo OVX/O (ratas ovariectomizadas e instalação de pellet com óleo de milho), grupo OVX/E (ratas ovariectomizadas e instalação de pellet com 17β-estradiol), e grupo OVX/R (ratas ovariectomizadas e tratadas com raloxifeno). Após 08 dias da ovariectomia, foi realizado extração dos incisivos superiores direito seguido de reimplante dentário tardio. Os animais sofreram eutanásia aos 60 dias após o reimplante para realização da análise histomorfométrica. Resultados: Existiram diferenças estatísticas (P<0,05) favoráveis para os grupos OVX/E e OVX/R comparados aos demais grupos, com relação as variáveis reabsorção inflamatória, e reabsorção total; não existiram diferenças estatísticas com relação a reabsorção por substituição (P≥0,05). Em relação ao perímetro de anquilose, constatou-se diferenças estatísticas favoráveis nos grupos OVX/E e OVX/R, comparados aos grupos Sham e OVX/O (P<0,05). Em relação ao perímetro de ligamento periodontal, observou-se que os grupos OVX/E e OVX/R apresentaram resultados estatisticamente favoráveis sobre os demais grupos, sendo que o grupo OVX/R apresentou também diferenças estatísticas favoráveis comparado ao grupo OVX/E (P<0,05). Conclusão: Esses dados permitem concluir que a ovariectomia influenciou de forma significativa no processo de reparo do reimplante tardio. A terapia com raloxifeno favoreceu a permanência de tecido fibroso/ligamento periodontal, e diminuição do índice de reabsorção inflamatória e reabsorção total

Objectives: The objective of this study was to analyze the effect of ovariectomy and estrogen replacement therapy with 17β-estradiol or raloxifene treatment on periodontal tissues after delayed tooth replantation using histomorphometric analysis in rats. Materials and methods: Forty Wistar rats (Rattus norvegicus, Albinus) with normal estrous cycles were divided into 04 groups: Sham group (control group), OVX/O group (ovariectomized rats with corn oil pellet), OVX/E group (ovariectomized rats with 17β-estradiol pellet), and OVX/R group (ovariectomized rats treated with raloxifene). After 08 days of ovariectomy, it was performed extraction of upper incisors followed by delayed tooth replantation. The animals were euthanized 60 days after reimplantation to perform the histomorphometric analysis. Results: There were statistically significant differences (P<0.05) favorable to the OVX/E and OVX/R groups compared to the other groups regarding the variables inflammatory resorption, and total resorption; there were no statistical differences with respect to replacement resorption (P≥0.05). In relation to the perimeter of ankylosis, it has been found favorable statistical differences in the OVX/E and OVX/R groups, compared with OVX/O and Sham groups (P<0.05). Regarding the perimeter of periodontal ligament, it was found that OVX/E and OVX/R groups had statistically favorable results of the other groups, and the OVX/R group also showed favorable statistical differences compared to the OVX/E group (P<0.05). Conclusion: These data support the conclusion that ovariectomy had a significant influence in the healing process of delayed tooth replantation. Raloxifene therapy favored the permanence of fibrous tissue/periodontal ligament, and decreased inflammatory resorption and total resorption rate